（一）询问病史：对原发闭经患者应详细询问其母妊娠过程中有无急性传染病如风疹等病毒感染，有否接受激素或其它致畸药物、放射线等治疗。患者及其亲属生长发育过程中，有无性发育异常史。对继发闭经患者应了解月经情况，如初潮年龄，既往月经周期、经量，闭经期限，无周期性腹痛。有无手术切除子宫或卵巢史，有无全身慢性疾病如结核、营养不良以及甲状腺，肾上腺功能亢进或减退。有无精神刺激或生活环境改变等诱因，有否接受过激素治疗，药物种类、剂量、疗程、效果、末次用药时间，有否接受抗精神病药物等。已婚妇女尚需注意是否服过避孕药，有无粗暴或多次刮宫产后大出血史。另外还需注意有无毛发增加，肥胖、溢乳、头痛、视力改变等病史。
（二）体格检查
1.全身检查：注意一般发育及营养状况(精神神经类型)，智力发育，有无躯体畸形，必要是要测量身高，体重及指距，第二性征发育，有无肥胖、多毛、溢乳等。
2.妇科检查：注意外阴发育，有无阴蒂肥大等外阴畸形，阴毛的多少及分布。有无阴道，阴道，处女膜有无梗阻、畸形，子宫有无及大小，卵巢是否肿大等。
（三）特殊检查
由于闭经病因复杂，辅助特殊检查项目亦繁多，一般均应根据诊断步骤的深入，按需要加以选择。
1.下丘脑C垂体C卵巢C子宫轴激素功能试验：目的在于监测和评估生殖激素靶器官的功能状态，以确定闭经病理分区和原因并指导治疗。
(1)孕激素试验：目的是评估内源性雌激素水平和子宫内膜反应性，以鉴别闭经的程度及子宫或卵巢性闭经。黄体酮20mg／d肌注3～5天。停药观察撤血(撤药性出血)情况。有撤血者为阳性，说明有
一定的内源性雌激素分泌且子宫内膜反应性良好，并排除妊娠和子宫性闭经，可诊断为卵巢功能失调性闭经。无撤血者为阴性，说明内膜反应不良或内源雌素分泌不足以使内膜增生，故应在排除妊娠后
作雌激素试验。
(2)雌激素试验：目的检测子宫内膜反应性，以鉴别子宫性闭经和卵巢性闭经。乙烯雌酚1mg／d连服20天，或肌注苯甲酸雌二醇1mg／Qod共10次，停药观察撤血情况：也可应用孕酮撤血，即在应用雌
激素的最后4日加肌注黄体酮20mg／d，此实际上即为人工周期实验有撤血者试验阳性，说明缺乏内源性雌激素分泌而子宫内膜反应良好，此属为闭经，并可排院子官性闭经和妊娠，说明闭经在卵巢水平以上。无撤血者试验阴性说明子宫性闭经。
(3)促性腺激素试验：目的在于检测卵巢对促性腺激素反应性，以鉴别卵巢性和垂体性闭经。hMGl50U／d肌注10～14天，或pFSH75U／d10～14天，以观察卵泡发育情况和激素变化。有卵泡发育或排卵者为激素性闭经，反之为卵巢性闭经。重复大剂量仍无卵泡发育者为卵巢不敏感综合征。
(4)垂体兴奋试验：即GnRH试验，包括典型方法及Combes方法试验，目的在于检测垂体前叶对GnRH的反应性及LH两库存储备和释放功能，以鉴别下丘脑和垂体性闭经。正常反应是在静注GnRH后15～60分钟，LH值较注射前高2～4倍以上(经典型法）：或静滴后出现60分钟内LH上升及2～4小时内LH第二次上升的双相型分泌(Combes法）。正常反应提示垂体功能正常，闭经为下丘脑病变所致。迟缓或低平反应为垂体性闭经。需要注意的是垂体未完全破坏时仍可释放较多的LH，相反正常垂体在较长时间失去内源性GNRH的刺激，亦可出现惰性，因而需多次测定方可得出正确的结论。
(5)氯酚胺试验(clomiPhenetest)：目的检测HPO轴正、负反馈机转的完整性和功能状态，以鉴别下丘脑和垂体性闭经。试验阳性者提示下丘脑功能无损害，闭经病因在垂体：阴性者表明闭经为下丘脑功能失调。
(6)催乳素试验(pr01actintest)：即检测PRL、GH、TSH释放功能。包括①THR试验；②氯丙嗪试验；②胰岛素耐量试验；④精氨酸试验；⑤左旋多巴试验；⑥溴隐亭试验。
2．其他特殊检查
(1)激素测定：了解下丘脑C垂体C卵巢轴功能状况。
①垂体激素测定
1)促性腺激素：对雌激素试验阳性的R。闭经患者，应寻找雌激素缺乏的原因，区别雌激素缺乏是由于卵巢本身病变丧失分泌雌孕激素的能力，还是由于垂体促性腺激素不足而致使卵巢不能分泌雌激素。目前多应用放射免疫法或磁酶免法测定促卵泡激素(FSH)和黄体生成素(LH)。其正常范围FSH5C40IU儿，LH5C251U从，在正常周期中排卵期高峰为基值的3倍。闭经患者若雌激素低于早期卵泡期水平而FSH增高＞401U儿，提示卵巢功能衰竭，反之若FSH、LH正常或低下则提示病变在垂体或下丘脑促性腺激素释放激素分泌不足；雌激素水平在正常范围，LH增高，FSH正常或略低，其比值大于3，往往提示多囊卵巢综合症。由于FSH，LH呈脉冲式分泌，且在排卵期均有一高峰，故多次测定异常方可做出结论。另外服用雌激素等药物时，因其影响促性腺激素的分泌，故应停药撤退出血后再行测定：
2)泌乳素：泌乳素(PRL)浓度呈脉冲式分泌，有昼夜波动，PRL水平增高有助于高分泌乳素血症，闭经泌乳综合征或垂体泌乳素瘤，或应激状态及药物的影响，甲状腺功能低下所致高泌乳素血症之诊断。
3)其他垂体激素：其他内分泌疾病引起的闭经，还应分别测定相应的垂体激素，如促甲状腺激素（TSH）、促肾上腺皮质激素(ACTH)、生长激素(GH)等，以资闭经鉴别诊断。
②性腺激素测定
1)雌激素：测定血或尿雌二醇(E z)浓度，结合B超检查，能更精确地提示卵巢内卵泡发育的程度，雌激素水平低下闭经可能由于卵巢早衰或继发于下丘脑C垂体功能失调，高泌乳素血症或药物的抑制作用。雌激素水平在正常周期范围内变化，表明卵泡发育正常，应考虑子宫闭经症。
2)孕激素：测定血或尿孕激素水平可确定有无排卵及黄体功能状况，闭经患者孕激素常低下
3)雄激素：近年来一般是直接测定血睾丸酮(T)及去氢表雄酮。闭经伴有多毛、男性化等现象时应了解体内雄激素水平，该测定有助于多囊卵巢综合征，两性畸形或卵巢男性化肿瘤的诊断：
③肾上腺皮质激素测定：怀疑闭经与肾上腺皮质功能异常有关时，通常测定24h尿游离皮质醇（尿17酮及尿17经类固醇)排出量及血总皮质醇(C)，其增高说明肾上腺皮质增生，常见如柯兴氏综合征；低下则说明肾上腺皮质功能不全，常见如阿狄森氏病。二者均可引起闭经，不育。
④甲状腺激素测定：甲状腺机能亢进或低减亦出现闭经或闭经泌乳。通常可测定丁SH、T4 ，T3 。促使甲状腺激素(TSH)增高为原发性甲低最敏感的指标。甲状腺素(Td)增高提示甲亢，而减低提示甲低；三碘甲状腺原氨酸(T：)为T d在外周组织中脱碘而形成，其增高提示甲亢。
⑤胰岛素测定：
（1）多囊卵巢综合征出现闭经，测定空腹血浆胰岛素升高。
（2）基础体温测定(BBT)：间接反应卵巢功能，了解有无排卵，闭经患者多无排卵，故BBT呈单相，若BBT呈双相，提示卵巢功能正常，则应考虑子宫性闭经的可能。
（3）阴道脱落细胞涂片：可以间接了解卵巢功能，如细胞形态正常，有周期性变化，提示常卵巢功能，病变部位在子宫。
（4）宫颈粘液检查：根据宫颈粘液量的多少、性质、是粘稠还是稀薄、结晶类型等，了解雌激素水平的高低、有无周期变化等，如有周期变化，提示卵巢功能正常。
（5）子宫探针检查：了解宫腔通畅情况，排除宫腔粘连性闭经。
（6）诊断性刮宫和子宫内膜病理检查：了解有无排卵及黄体功能，并排除器质性病变如结核，炎症或肿瘤等。
（7）医学影像学检查：包括B／C型超声、头颅蝶鞍相Ｘ片摄片、CT、核磁共振、子宫输气造影及脑室、脑血管造影，确定有无生殖器官变异、肿瘤或垂体腺瘤引起的闭经，并判定病变的程度。
（8）内窥镜检查：包括宫腔镜、腹腔镜及后弯窿镜检查，可直接观察官腔的病变，以及子宫，性腺的形态态，必要时可在腹腔镜直视下行卵巢活检，了解有无发育不良、卵巢早衰、多囊卵巢以及性腺肿瘤等所致闭经。
（9）剖腹检查查和性腺活检：对于内窥镜未能明确诊断者，可行此项检查以进一步作出确诊。
（10）细胞遗传学检查：包括x、Y性染色质、染色体核型和分带染色分析，及必要时家谱分析。