腾喜龙或新斯的明会使胃肠道蠕动增强，宜在餐后2小时以后行此试验；会引起支气管平滑肌痉挛和心律改变，故支气管哮喘和心律紊乱者慎用。正在服用胆碱酯酶抑制剂的患者，应在服药2小时后行此试验，由于不同肌群受累程度可以不同，在此项试验时可出现对某些肌群已显示胆碱酯酶过量，而另一些肌群仍处于用量相对不足的状态。故应观察影响最大的肌群，或呼吸和延髓肌肌群。有时此试验能使胆碱能危象加重到危及生命的程度，试验时应在有人工呼吸机等相应急救设施的条件下进行，若推注这些药物2 mg后立即出现出汗、流涎、腹痛等症状时，可立即肌注阿托品0．5～1mg来终止反应，患者不宜空腹饥饿时做新斯的明试验，妇女在月经期间有痛经者、感冒发热期间也不宜做此试验。重症肌无力严重病例，可因神经-肌肉接头处突触后膜上乙酰胆碱受体破坏过重而致试验结果阴性，因此不能单凭此项试验阴性来否定重症肌无力的诊断。