一、脑脊液检查：细胞数正常或轻度升高，常为转化型浆细胞和淋巴细胞；蛋白质轻度升高或正常；大部分多发性硬化症的患者免疫球蛋白可增高；90%可见少克隆IgG；恶化期或病情复发可测出髓鞘碱性蛋白抗体阳性。
二、其他辅助检查：借CT、核磁共振或脑干诱发电位，有助于提高确诊率，可发现一些尚无临床表现的脱髓鞘病灶。
1.诱发电位 听觉、视觉、体感诱发电位可作为预测病情复发的指标，或有助于发现相应传导通路中的临床下病灶。
2.CT 或核磁共振 可显示脑室周围白质内的脱髓鞘病灶，核磁共振更为敏感。一组对3～15岁儿童的观察发现，CT的阳性率为42%，核磁共振的阳性率则为87%，且多能显示多灶性损害。
三、实验室检查：在脑脊液检查中，可发现枢神经系统内存在自身免疫抗体，目前还没有无特异性诊断方法。