复旦遗传工程国家重点实验室,|,PLOS,Biology刊发服部素之团队通过冷冻电镜阐述了镁离子通道MgtE的开放机制

MgtE与细菌在抗生素暴露后的生存能力相关。MgtE的人源同源蛋白SLC41的基因突变与高血压、帕金森综合症、糖尿病、肾结石等疾病相关。MgtE通道的闭合状态结构已由晶体学解析,开放状态结构仍未知。尽管MgtE有着重要的生物学功能,该通道蛋白在开放过程中的结构变化尚不清楚。

MgtE是在原核生物和真核生物中广泛分布的镁离子通道,在细胞膜上介导镁离子内流,对镁离子具有高度选择性。MgtE与细菌在抗生素暴露后的生存能力相关。MgtE的人源同源蛋白SLC41的基因突变与高血压、帕金森综合症、糖尿病、肾结石等疾病相关。在高浓度镁离子条件下通道闭合,在无镁离子条件下通道开放,开放时细胞质结构域构象不均一。MgtE通道的闭合状态结构已由晶体学解析,开放状态结构仍未知。尽管MgtE有着重要的生物学功能,该通道蛋白在开放过程中的结构变化尚不清楚。

2021年4月27日,复旦大学生命科学学院服部素之团队在PLOS Biology杂志在线发表题为 “The structure of MgtE in the absence of magnesium provides new insights into channel gating” 的文章,利用冷冻电镜单颗粒分析技术解析了无镁离子条件下MgtE-Fab抗体复合物的结构,展现了MgtE在无镁离子条件下预开放的状态,为MgtE通道开放机制提供了新见解。

MgtE-Fab抗体复合物结构

该冷冻电镜结构中,MgtE呈对称二聚体,Fab抗体分子结合在TM结构域的胞质侧,且无法观测到MgtE细胞质结构域的电子密度。离子传导孔位于二聚体中心, 在无镁离子条件下,在胞质端的保守的天冬酰胺侧链相互远离,孔道变宽。我们通过化学交联实验、分子模拟实验、大肠杆菌遗传学实验等功能性实验验证了MgtE通道在胞质端的开放。然而,在离子传导孔周质端的保守的丙氨酸残基周围,孔道依旧闭合,说明通道没有完全开放。根据膜片钳记录结果,MgtE在无镁离子条件下处于开放和闭合之间的平衡状态,而不是处于连续开放状态。因此,我们的冷冻电镜结构可能代表了MgtE在无镁离子条件下的预开放状态。在这种预开放状态下,MgtE的细胞质结构域完全无序,Plug螺旋没有与TM结构域互作,从而无法将通道锁定在闭合状态,因此通道在胞质端打开。

MgtE预开放的机制模型

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